Информация

Ферменты рестрикции: молекулярные ножницы

Ферменты рестрикции: молекулярные ножницы



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

С 1970-х годов было легче анализировать молекулу ДНК с выделением фермента рестрикции.

Эти ферменты эндонуклеазыт.е. внутри (отсюда и префикс эндо- внутри) молекулы ДНК, разрезая их в четко определенных местах.

Это ферменты, обычно вырабатываемые бактериями, которые имеют свойство защищать их от вторжения вирусов. Эти вещества всегда «тыкают» молекулу ДНК в определенных точках, что приводит к образованию фрагментов, содержащих клейкие наконечники, которые могут связываться с другими концами молекул ДНК, которые были разрезаны с помощью того же фермента.

В генной инженерии, получение фрагментов ДНК служит для создания, в пробирке (в пробирке или лаборатории), новые молекулы, вырезать и вставлять различные фрагменты информации.

Один из первых рестриктаз, который был выделен, был EcoRI, произведенный бактериями Кишечная палочка. Этот фермент распознает только последовательность GAATTC и всегда действует между G и первым A.

«Разрезанный» сайт, сайт фермента, известен как целевой сайт. Вы можете спросить, почему этот фермент не действует на ДНК самой бактерии? Это не связано с существованием других защитных ферментов, которые препятствуют действию ферментов рестрикции на генетический материал бактерий.

рестриктазы распознают и действуют на определенные последовательности ДНКкатализируя разрушение фосфодиэфирной связи между двумя последовательными основаниями, связанными с определенными основаниями. Нуклеотиды, между которыми разрезает фермент, то есть между которыми он способствует гидролизу, находятся в этих же специфических последовательностях распознавания (см. Изображение).

Каждая молекула ДНК может состоять из нескольких повторов последовательности GAATTC по всей ее длине. Поэтому при контакте с ферментом EcoRI нить ДНК может быть «разрезана» в нескольких местах, образуя несколько кусочков разных размеров.

Ниже мы увидим, как эти разные расщепленные кусочки ДНК разделены.


Видео: CTRL+V для ДНК: рестрикция и лигирование. Курс "ГМО: технологии создания и применение" (August 2022).